1．檢測(cè)樣本若渾濁應(yīng)過(guò)濾后使用．

2．現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)出的陽(yáng)性樣品應(yīng)采用孔雀石綠速測(cè)試劑盒(Ⅱ型) 進(jìn)行確認(rèn)或采用液相色譜法測(cè)定。

3．孔雀石綠標(biāo)準(zhǔn)工作液的使用：本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)工作液可提供初學(xué)者訓(xùn)練。標(biāo)準(zhǔn)工作液濃度為75ug/ml，用前可取水50mL加入1滴標(biāo)準(zhǔn)工作液即得到稀釋到0.075ug／mL的孔雀石綠溶液。取15ml稀釋液通過(guò)富集柱，富集柱的填料中有明顯的綠色出現(xiàn)．

 

孔雀石綠快速檢測(cè)試劑盒概要

孔雀石綠是一種帶有金屬光澤的綠色結(jié)晶體，又名堿性綠、嚴(yán)基塊綠、孔雀綠，其既是殺真菌劑，又是染料，易溶于水，溶液呈藍(lán)綠色。長(zhǎng)期以來(lái)，漁民都用它來(lái)預(yù)防魚(yú)的水霉病、鰓霉病、小瓜蟲(chóng)病等，而且為了使鱗受損的魚(yú)延長(zhǎng)生命，在運(yùn)輸過(guò)程中和存放池內(nèi)，也常使用孔雀石綠。研究顯示，孔雀石綠在魚(yú)內(nèi)殘留時(shí)間很長(zhǎng)，且其具有高毒性、高殘留和致癌、致畸、致突變等副作用，鑒于此，許多國(guó)家均將孔雀石綠列為水產(chǎn)養(yǎng)殖禁用藥物。

 

孔雀石綠快速檢測(cè)試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)酶標(biāo)免疫法，可經(jīng)濟(jì)、快速地檢測(cè)魚(yú)、蝦等樣品中的孔雀石綠、隱性孔雀石綠、結(jié)晶紫等殘留。本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)而成的檢測(cè)產(chǎn)品，能大限度地減少操作誤差和工作強(qiáng)度。

 

孔雀石綠快速檢測(cè)試劑盒原理

孔雀石綠檢測(cè)試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，同時(shí)把隱性孔雀石綠氧化成孔雀石綠，檢測(cè)魚(yú)、蝦以及魚(yú)池或魚(yú)缸水樣中的總的孔雀石綠（Malachite Green ，MG），試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、辣根酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測(cè)時(shí)，加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液，樣本中的孔雀石綠和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗孔雀石綠抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含孔雀石綠含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中孔雀石綠的殘留量。

 

【樣品處理】

一、 水樣：用滴管直接吸取水樣進(jìn)行檢測(cè)。

二、組織樣（蝦要去掉頭和殼后*洗凈，魚(yú)要去鱗后洗凈）

1、取切碎的一定量的組織樣本，用均質(zhì)器均質(zhì)；

2、稱(chēng)取3ｇ已均質(zhì)樣本至15ml離心管中；加入2ml提取劑A，3ml提取劑B，一管氧化劑，在漩渦震蕩儀上充分振蕩混勻3min，或手搖5min,4000r/min離心5min。

3、取上清1ml于5ml離心管中，加兩滴助溶劑。

4、搖晃均勻后,65℃水浴下，氮（空）氣吹干。

5、加入0.2ml底物復(fù)溶液溶洗滌離心管（沖洗完成后立即進(jìn)行步驟6，間隔時(shí)間切勿超過(guò)3分鐘）。

6、吸取待檢樣本溶液0.1ml（約三滴）于金標(biāo)微孔中，用復(fù)溶液滴管輕輕吹打至孔內(nèi)紅色物質(zhì)*溶解，等待反應(yīng)5分鐘。

 

【使用步驟】

1.測(cè)試前先完整閱讀使用說(shuō)明書(shū)，使用前將試劑板和待檢樣本溶液回復(fù)至室溫（20℃-30℃）；

2.從原包裝袋中取出檢測(cè)卡，水平放置于觀察者正面（打開(kāi)后立即使用）；

3.吸取金標(biāo)微孔中的所有溶液加至加樣孔中（見(jiàn)下圖），加樣后開(kāi)始計(jì)時(shí)；

4.結(jié)果應(yīng)在 5 - 8 分鐘讀取，其他時(shí)間判讀無(wú)效。